Dynamics of morphometric and optical parameters of rat lymphocytes under the influence of copper-zinc pyrite ore

Full Text

Введение

В ряде работ, проведенных в последнее десятилетие с помощью метода компьютерной морфометрии, установлено, что такие показатели лимфоцитов периферической крови, как диаметр, периметр и площадь, отражают не только морфологические особенности клеток, но и их функциональную активность [1]. Это позволило использовать диагностическую морфометрию для оценки иммунного статуса организма, в частности при остром миелоидном лейкозе и при апластической анемии [2, 3]. Другим информативным морфофункциональным показателем клеток является их объем, для измерения которого используется кондуктометрический метод. Определение объема с помощью данного метода проводится в условиях, приближенных к естественному кровотоку, где клетки принимают свой­ственные их физиологическому состоянию форму.

Преимущество описанных методов состоит в возможности оценить состояние не только отдельных клеток, но и в целом популяции лимфоцитов, представляющих собой совокупность клеточных форм, отличающихся друг от друга и по микроструктуре, и по функции. Так, установлено, что основную массу клеток у здоровых лиц составляют субпопуляции малых и средних лимфоцитов, включающих преимущественно Т-хелперы (95 % от общего числа циркулирующих клеток) и цитотоксические Т-лимфоциты (около 50 %) [4]. Незначительное количество клеток, обладающих крупными размерами, представлено незрелыми тимоцитами и натуральными киллерами [5]. Достоинство компьютерной морфометрии заключается в том, что, исследуя оптические свой­ства лимфоцитов, наряду с размерными показателями, можно получить информацию об особенностях химического состава клетки и состоянии клеточных структур.

Анализ динамики морфометрических и оптических параметров, объективно отражающей процессы перестройки клеточных звеньев иммунной системы, позволяет оценивать ее состояние при действии различных внешних и внутренних факторов [1]. При этом изменение диапазона варьирования размерных показателей лимфоцитов свидетельствует о нарушении иммунореактивности организма и развитии патологических процессов при воздействии на организм неблагоприятных факторов среды [1, 6]. В связи с этим большое прикладное значение имеет изучение морфометрических свой­ств лимфоцитов периферической крови лабораторных животных под воздействием солей тяжелых металлов, входящих в состав руд, с которыми контактируют работники горнодобывающих предприятий. Так, в исследовании Власовой Н.В. и Масягутовой Л.М. и др. было зафиксировано увеличение количества лейкоцитов и, в частности, лимфоцитов более чем в 2 раза у работников предприятия по добыче медно-цинковых колчеданных руд (МЦКР) [7]. В Башкортостане имеется 3 крупных месторождения, основным продуктом которых является МЦКР, в их составе обнаруживается около 60 вредных примесей, в том числе и соли тяжелых металлов, такие как мышьяк, сурьма, ртуть, фтор и другие [7].

Целью данной работы являлось исследование морфометрических и оптических параметров лимфоцитов (площадь поверхности клетки, ядра, цитоплазмы, объем и оптическая плотность) периферической крови крыс под воздействием медно-цинковой колчеданной руды.

Материалы и методы

Влияние МЦКР на гематологические параметры проведено на 70 белых нелинейных крысах-самцах в возрасте 3–4 мес., массой 210,5 ± 10,5 г. Продолжительность опыта составила 60 дней. В зависимости от срока интоксикации МЦКР было сформировано 6 групп: контрольная и 5 опытных. В подопытных группах в течение 10, 20, 30, 45 и 60 суток крысам перорально вводили водную суспензию руды (доза 600 мг/кг массы тела) [8]. Все эксперименты были выполнены в соответствии с Женевской конвенцией «Internetional Guiding Principals for Biomedical Involving Animals» (Geneva, 1990), а также Хельсинской декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации о гуманном отношении к животным (редакция 2000 г.). Исследование было одобрено локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО «Башкирский государственный университет» Минздрава РФ, протокол № 5 от 13.09.2017.

Для содержания животных использовали стандартные клетки (n = 6) со свободным доступом к воде и пище при средней температуре воздуха в виварии 24 ± 2 °C в соответствии с правилами СП 2.2.1.3218 и с Директивой 2010/63/EU по охране животных, используемых в научных целях. Взятие периферической крови из хвостовой вены и эвтаназию животных путем декапитации проводили под эфирным наркозом [9].

Образец руды был предоставлен Учалинским горно-обогатительным комбинатом. Морфометрические параметры лимфоцитов определяли методом компьютерной морфометрии в мазках периферической крови, окрашенных по Романовскому – ­Гимзе, с помощью комплекса автоматической микроскопии МЕКОС-Ц2 софт (Россия), установленного в составе функций для анализа мазков на микроскопе AXIO Lab.A1 (ZEISS, Германия). При просмотре мазков крови для подсчета лейкоцитарной формулы визуально определяли типы лейкоцитов, создавали базу их изображений и после сортировки осуществляли передачу данных в MS Excel. На основе подсчета в каждом образце площади двухсот клеток строили гистограммы распределения, которые позволили учитывать не только средние величины показателей, но и параметры распределения, а также соотношение долей клеток разного размера.

При анализе цитологических изображений изучали оптическую плотность цитоплазмы и ядра лимфоцитов. Для оценки параметров оптической плотности применяли распределение гистограммы яркости по объекту с помощью показателя удельной оптической плотности (УОП). УОП измерялась в трех спектральных диапазонах видеокамеры — синем (УОПс), зеленом (УОПз), красном (УОПк), окраска определялась цветом тех лучей, которые вещество поглощало. Суммарная оценка спектрального диапазона отражает степень функциональной активности клетки. Для определения интегральной оптической плотности цитоплазмы выполнялся расчет индекса оптической плотности (ИОП) и удельная суммарная оптической плотности (УСОП) — (УСОП  =  УОПК +УОПЗ + УОПС), в усл. ед. Оптической плотности по каждой из трех компонентов спектра соответствовала своя область поглощения [10].

Количество и объем лимфоцитов крыс изучали на ветеринарном полуавтоматическом гематологическом анализаторе Vet Exigo 19 (Швеция). Средний объем лимфоцитов (MLV) и асимметрию распределения (As) лимфоцитов рассчитывали по гистограммам распределения, предоставляемых гематологическим анализатором [11]. На их основе составлялись интервальные вариационные ряды данных и рассчитывались средний объем лимфоцитов и As.

Полученные данные обрабатывались с использованием математического пакета Statistica 12 (StatSoft, США). Для оценки статистической значимости различий выборок использовали непараметрические критерии Манна–­Уитни и Краскела–Уоллиса. Рассчитывали: медиану распределения клеток по объему (Ме), интерквартильные размахи (Q1; Q3) и асимметрию распределения. Различия считали статистически значимыми при p<0,05. Оценку связей осуществляли с помощью непараметрического коэффициента корреляции Спирмена.

Результаты и обсуждение

Гистограммы распределения лимфоцитов крыс по площади, занимаемой клетками на стекле (SL), и объему (MLV) в исходном состоянии крыс на разных сроках эксперимента представлены на рис. 1.

Кривым распределения клеток по площади и объему в контроле и с 10‑х суток эксперимента была свой­ственна островершинность (положительный эксцесс) и положительная As, проявляющаяся в сдвиге вершины распределения влево от ее центра вследствие наличия длинного «хвоста» в области больших величин показателей.

Исходя из сопоставления гистограмм SL и MLV отмечалось характерное совпадение этих кривых распределения. Во все сроки исследования максимум в гистограммах распределения по объему и площади приходился на 60 фл и мкм², соответственно, за исключением 45‑х суток. В контроле доля относительно мелких клеток (до 60 мкм², фл) составляла 48 %, а средних (до 90 мкм², фл) — 43 %, то есть в сумме на них приходилось более 90 % от всех циркулирующих клеток. Характер кривых распределения в первые сроки эксперимента изменился незначительно. На 30‑е сутки, судя по гистограммам SL и MLV, происходил сдвиг вершины влево (As по площади в контроле составила 0,73 ± 0,08, на 30‑е сутки — 2,99 ± 0,10; As по объему в контроле — 0,80 ± 0,09, на 30‑е сутки — 0,85 ± 0,08 соотвественно), обусловленный возрастанием в общей популяции доли более крупных клеток. Средняя площадь клеток статистически значимо не изменилась (Табл. 1), но при этом произошло достоверное возрастание объема клеток на 8 %.

Таблица 1
Показатели лимфоцитов крыс, подвергнутых воздействию медно-цинковой колчеданной руды, Ме (Q1; Q3)

Показатели	Контрольная группа	Опытная группа 10 дней	Опытная группа 20 дней	Опытная группа 30 дней	Опытная группа 45 дней	Опытная группа 60 дней
Количество лимфоцитов  (х109 клеток/л)	10,45  (9,10; 12,50)	14,55  (10,85; 18,00)*	11,40  (10,50; 14,20)	12,20  (10,80; 14,60)	16,80  (9,80; 18,80)*	13,50  (10,20; 16,50) *
Средний объем лимфоцитов, фл	65 (55; 80)	60 (40; 80)*	65 (55; 70)	70 (65; 90)*	60 (60; 65) *■⏺	65,00 (65; 65) ⏺▲
Средняя площадь лимфоцитов, мкм2	65,00  (52,00; 79,00)	64,00  (51,00; 76,00)	63,00  (49,00; 79,00)	63,00  (51,00; 78,00)	73,00  (60,00; 86,00) *△	62,00  (54,00; 74,00)
Средняя площадь цитоплазмы, мкм2	20,00  (14,00; 27,00)	13,00  (9,00; 19,00)*	10,00  (5,00; 18,00)*△	14,00  (10,00; 25,00)*■	15,00  (10,00; 25,00)*■	13,00  (7,00; 20,00)*■
Средняя площадь ядра, мкм2	44,00  (35,00; 53,00)	48,00  (37,00; 59,00)*	52,00  (40,00; 65,00)*△	47,00  (38,00; 55,00)*■	54,00  (44,00; 66,00)*△⏺	48,00  (42,00; 58,00)*
Ядерно-клеточное отношение	0,68 (0,62; 0,74)*	0,78 (0,69; 0,84) *	0,84 (0,74; 0,91)*△■	0,75 (0,64; 0,81)*■■	0,78 (0,68; 0,86)*■⏺	0,79 (0,69; 0,89) *■⏺
Ядерно-цитоплазматическое отношение	2,13  (1,62;2,86)	3,54  (2,27,5,44) *	5,12 (2,82;10,33) *△	3,0 (1,81; 4,33) *△■	3,65 (2,08;6,27) *■	3,72 (2,20;7,80) *■⏺

Примечание: * — статистически значимое отличие показателя опытной группы по отношению к значению контрольной группы крыс (р < 0,05); △ — к 10‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ■ — к 20‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ⏺ — к 30‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ▲ — к 45‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05).

 Table 1
Lymphocyte counts of rats exposed to copper-zinc pyrite ore, Me (Q1; Q3)

Indicators	Control group	Experimental group 10 days	Experimental group 20 days	Experimental group 30 days	Experimental group 45 days	Experimental group 60 days
Number of lymphocytes (x109 cells/l)	10.45  (9.10; 12.50)	14.55  (10.85; 18.00)*	11.40  (10.50; 14.20)	12.20  (10.80; 14.60)	16.80  (9.80; 18.80)*	13.50  (10.20; 16.50) *
Average volume of lymphocytes, fl	65 (55; 80)	60 (40; 80)*	65 (55; 70)	70 (65; 90)*	60 (60; 65) *■⏺	65.00 (65; 65) ⏺▲
The average area of lymphocytes, mm2	65.00  (52.00; 79.00)	64.00  (51.00; 76.00)	63.00  (49.00; 79.00)	63.00  (51.00; 78.00)	73.00  (60.00; 86.00) *△	62.00  (54.00; 74.00)
The average area of the cytoplasm, microns 2	20.00  (14.00; 27.00)	13.00  (9.00; 19.00)*	10.00  (5.00; 18.00)*△	14.00  (10.00; 25.00)*■	15.00  (10.00; 25.00)*■	13.00  (7.00; 20.00)*■
Average core area, mm2	44.00  (35.00; 53.00)	48.00  (37.00; 59.00)*	52.00  (40.00; 65.00)*△	47.00  (38.00; 55.00)*■	54.00  (44.00; 66.00)*△⏺	48.00  (42.00; 58.00)*
The nuclear-cellular relationship	0.68 (0.62; 0.74)*	0.78 (0.69; 0.84) *	0.84 (0.74; 0.91)*△■	0.75 (0.64; 0.81)*■■	0.78 (0.68; 0.86)*■⏺	0.79 (0.69; 0.89) *■⏺
The nuclear-cytoplasmic relationship	2.13  (1.62;2.86)	3.54  (2.27.5.44) *	5.12 (2.82;10.33) *△	3.0 (1.81; 4.33) *△■	3.65 (2.08;6.27) *■	3.72 (2.20;7.80) *■⏺

Note: * — statistically significant difference in the indicator of the experimental group in relation to the value of the control group of rats (p < 0.05); △ — to the value of the 10‑day experimental group of rats (p < 0.05); ■ — to the value of the 20‑day experimental group of rats (p < 0.05); ⏺ — to the value of the 30‑day experimental group of rats (p < 0.05); ▲ — to the value of the 45‑day experimental group of rats (p < 0.05).

На 45‑е сутки форма гистограммы распределения по объему, согласно средней величине и As (0,77 ± 0,06), вернулась к исходному состоянию (в контроле), проявляясь в уменьшении «хвоста» распределения в области высоких значений. Но при этом было выявлено смещение вершины кривой SL в сторону больших величин (73 мкм²) и симметричности гистограммы. Таким образом, вслед за изменением соотношения долей клеток по площади произошло увеличение среднего размера, при этом доля клеток среднего размера (75 и 90 мкм²) составила более 50 % по сравнению с остальными сроками, в которых доля средних клеток не выходила за пределы 43 %. Следует отметить на этом сроке возросло количество лимфоцитов в циркуляции (Табл. 1).

Изучение внутриклеточных параметров — площадь ядра и цитоплазмы (Табл. 1) показало, что площадь, занимаемая ядром, достоверно увеличивалась по сравнению с контролем во все сроки эксперимента. Динамика площади цитоплазмы имела обратную тенденцию: начиная с 10‑х суток произошло ее значимое уменьшение, и в последующие сроки средняя площадь цитоплазмы лимфоцитов оказалась достоверно ниже значений в контроле (на 10‑е сутки уменьшилась на 35 %, на 20‑е сутки — на 50 %, на 30‑е сутки — на 30 %, на 45‑е сутки — на 25 %, на 60‑е сутки — на 35 % соответственно). При этом уменьшение площади цитоплазмы, как показывает сравнение ядерно-цитоплазматического отношения, происходило на фоне увеличения доли, занимаемой ядром, при неизменной площади клетки. Исключение составляла картина на 45‑е сутки, когда было зафиксировано максимальное значение общей поверхности клетки, обусловленное достоверным увеличением площади ядра по сравнению с контролем и предыдущими сроками исследования (на 10‑е сутки увеличение произошло на 9 %, на 20‑е сутки — на 18 %, на 30‑е сутки — на 7 %, на 45‑е сутки — на 23 %, на 60‑е сутки — на 9 % соответственно).

Наибольшее статистически значимое изменение индекса поляризации, характеризующей степень эллиптичности объекта, распластанного на стекле, происходило на 30‑е и 45‑е сутки по сравнению с контролем (контроль — 0,09 (0,05; 0,15), на 30‑е сутки — 0,14 (0,08; 0,23), на 45‑е сутки — 0,14 (0,09; 0,22) при (p < 0.05)). В эти сроки клетки приобретали наименее симметричную форму с дальнейшим восстановлением до контрольных величин на 60‑е сутки (0,09 (0,06; 0,14), при (p < 0.05)). Примечательно, что в эти сроки имели место различия между показателями площади и объема лимфоцитов (на 30‑е сутки MLV составил 70 фл, SL — 63 мкм²; на 45‑е сутки MLV — 60 фл, SL — 73 мкм²; на 60‑е сутки MLV — 65 фл, SL — 62 мкм² соответственно).

Особый интерес представляет анализ параметров, характеризующих оптические свой­ства цитоплазмы и ядра (Табл. 2).

Таблица 2
Оптические показатели лимфоцитов крыс, подвергнутых воздействию медно-цинковой колчеданной руды, Ме (Q1; Q3)

Показатели	Контрольная группа	Опытная группа 10 дней	Опытная группа 20 дней	Опытная группа 30 дней	Опытная группа 45 дней	Опытная группа 60 дней
Интегральная оптическая плотность цитоплазмы, усл.ед.	0,39  (0,27; 0,51)	0,18  (0,13; 0,29)*	0,13  (0,06; 0,21)*△	0,31  (0,17; 0,49)*△■	0,23  (0,13; 0,37) *■⏺	0,17  (0,08; 0,26) *⏺▲
Удельная суммарная оптическая плотность цитоплазмы, усл.ед.	1,20  (0,97;1,48)	0,87*  (0,75;1,02)	0,82*  (0,65;1,03)	1,07*△■ (0,82;1,63)	1,04*△■ (0,80;1.30)	0,78*△⏺▲  (0,62;0,98)
Удельная оптическая плотность ядра по красной компоненте, усл.ед	1,28  (1,07;1,52)	0,92*  (0,77; 1,15)	0,74 *△ (0,60;0,95)	1,05*△■  (0,83; 1,29)	0,71 *△⏺ (0,63;0,84)	0,74 *△⏺ (0,59;0,84)
Удельная оптическая плотность ядра по зеленой компоненте, усл.ед	1,74 (1,34;2,10)	0,82*  (0,69; 1,00)	0,59 *△  (0,50;0,76)	1,34 *△■  (0,94;1,90)	0,56*△⏺  (0,48;0,67)	0,71 *△■⏺▲ (0,58;0,86)
Удельная оптическая плотность ядра по синей компоненте, усл.ед	0,47 (0,33;0,61)	0,16 *  (0,13;0,21)	0,11 *△ (0,08;0,15)	0,38 *△■  (0,18;0,58)	0,10 *△⏺  (0,07;0,14)	0,15*■⏺▲  (0,12;0,19)

Примечание: * — статистически значимое отличие показателя опытной группы по отношению к значению контрольной группы крыс (р < 0,05);  △ — к 10‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ■— к 20‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ⏺ — к 30‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05); ▲ — к 45‑дневной опытной группы крыс (р < 0,05).

 Table 2
Optical parameters of lymphocytes of rats exposed to copper-zinc pyrite ore, Ме (Q1; Q3)

Indicators	Control group	Experimental group 10 days	Experimental group 20 days	Experimental group 30 days	Experimental group 45 days	Experimental group 60 days
Integral optical density of the cytoplasm, conventional units	0.39  (0.27; 0.51)	0.18  (0.13; 0.29)*	0.13  (0.06; 0.21)*△	0.31  (0.17; 0.49)*△■	0.23  (0.13; 0.37) *■⏺	0.17  (0.08; 0.26) *⏺▲
The specific total optical density of the cytoplasm, conventional units	1.20  (0.97;1.48)	0.87*  (0.75;1.02)	0.82*  (0.65;1.03)	1.07*△■ (0.82;1.63)	1.04*△■ (0.80;1.30)	0.78*△⏺▲  (0.62;0.98)
Specific optical density of the core according to the red component, conventional units	1.28  (1.07;1.52)	0.92*  (0.77; 1.15)	0.74 *△ (0.60;0.95)	1.05*△■  (0.83; 1.29)	0.71 *△⏺ (0.63;0.84)	0.74 *△⏺ (0.59;0.84)
Specific optical density of the core according to the green component, conventional units	1.74 (1.34;2.10)	0.82*  (0.69; 1.00)	0.59 *△  (0.50;0.76)	1.34 *△■  (0.94;1.90)	0.56*△⏺  (0.48;0.67)	0.71 *△■⏺▲ (0.58;0.86)
Specific optical density of the core according to the blue component, conventional units	0.47 (0.33;0.61)	0.16 *  (0.13;0.21)	0.11 *△ (0.08;0.15)	0.38 *△■  (0.18;0.58)	0.10 *△⏺  (0.07;0.14)	0.15*■⏺▲  (0.12;0.19)

Note: * — statistically significant difference in the indicator of the experimental group in relation to the value of the control group of rats (p < 0.05); △ — to the value of the 10‑day experimental group of rats (p < 0.05); ■ — to the value of the 20‑day experimental group of rats (p < 0.05); ⏺ — to the value of the 30‑day experimental group of rats (p < 0.05); ▲ — to the value of the 45‑day experimental group of rats (p < 0.05).

Информативная ценность изучения оптических свой­ств заключается в том, что они отражают особенности протекания метаболизма в исследуемых клетках в норме и при патологических процессах. В результате исследования было выявлено снижение оптической плотности цитоплазмы во все сроки эксперимента по сравнению с контролем, свидетельствуя о снижение вязкости цитоплазмы (табл. 2). При этом установлена прямая корреляция суммарной оптической плотности цитоплазмы с ее площадью (r  =  0,57 в контроле, r = 0,56 на 10‑е сутки, r = 0,52 на 20‑е сутки, r = 0,69 на 30‑е сутки, r = 0,59 на 45‑е сутки, r = 0,77 на 60‑е сутки). Поскольку величина показателя преломления непосредственно зависит от функционального состояния внутриклеточных структур, можно предположить, что наблюдаемые в ходе эксперимента уменьшение площади и оптической плотности цитоплазмы по сравнению с контролем обусловлено снижением ее функциональной активности под воздействием руды (на 10‑е сутки площадь цитоплазмы уменьшилась на 35 % и удельная суммарная оптическая плотность цитоплазмы на 27,5 %; на 20‑е сутки — на 50 % и 31,7 %; на 30‑е сутки — на 30 % и 10,8 %; на 45‑е сутки — на 25 % и 13,3 %; на 60‑е сутки — на 35 % и 35 % соответственно по сравнению с контролем).

Во все сроки эксперимента обнаруженное нами увеличение размера ядра сочеталось со снижением оптической плотности по всем спектральным диапазонам (Табл. 2), свидетельствуя о преобразовании внутриядерной структуры клетки.

Известно, что размеры и форма ядра определяются не столько количеством ДНК, сколько модификацией хроматина [12], при этом увеличение площади ядра обусловлено, главным образом, превращением гетерохроматина в эухроматин [13]. Учитывая, что переход гетерохроматина в более рыхлую форму эухроматина сопровождается повышением площади ядра и клетки, изменения оптических свой­ств ядра во все сроки исследования можно расценивать как отражение изменения плотности упаковки хроматина, то есть трансформации неактивного гетерохроматина в активный эухроматин. Соответственно, максимальная активность ядра приходилась на 45‑е сутки, проявляясь в минимальной величине оптической плотности в наибольшем размере ядра и клетки в целом.

Проведенное исследование показало, что интоксикация организма крыс, возникающая при воздействии МЦКР, сопровождалась увеличением количества лимфоцитов, изменением их морфометрических и оптических параметров. Полученные данные соответствовали сведениям из литературных источников о том, что основную долю циркулирующих клеток составляют мелкие и средние лимфоциты [5]. Судя по форме гистограмм площади и объема клеток, на 30‑е и 45‑е сутки в популяции лимфоцитов происходило перераспределение в сторону увеличения доли более крупных клеток, сочетаясь на 45‑е сутки с возрастанием их количества. Проанализировав морфометрические показатели, можно заключить, что значимое возрастание SL на 45‑е сутки соответствовало наиболее выраженному увеличению размера ядра, при этом размер цитоплазмы значимо не отличался. Сопоставив этот факт с увеличением численности клеток в этот срок, можно допустить, что популяция лимфоцитов, поступающих в циркуляцию, пополнялась за счет клеток с увеличенным ядром. Согласно литературным источникам пополнение популяции клетками более крупного размера возможно за счет незрелых тимоцитов и естественных киллеров [4, 5, 14]. Аналогичные изменения состава популяции лимфоцитов периферической крови под влиянием витамина А наблюдались у норок, у которых были выявлены большие гранулярные лимфоциты, относящиеся к естественным киллерам [15]. Внутрипопуляционная перестройка лимфоцитов и появление групп клеток с разной площадью и объемом, может свидетельствовать о развитии иммунной реакции организма на воздействие токсических веществ руды [1]. Уточнить информацию о характере наблюдаемых процессов позволило изучение внутриклеточных компонентов.

Динамичными и объективными показателями состояния клетки являются размер и оптическая плотность ядра [12]. Их динамика отражает не только модификацию хроматина, но и состояние цитоскелета, ядерной мембраны, осмолярность клетки [12, 16]. При активации клетки претерпевает конформационные превращения структурная упорядоченность хроматина, в результате которых изменяются его оптические свой­ства [17, 18]. В силу этого обнаруженное в эксперименте увеличение размера ядра, сочетающиеся со снижением его оптической плотности, может свидетельствовать об изменении под влиянием МЦКР степени конденсации хроматина и соответственно усилении матричной активности ДНК [12, 19].

Наряду с увеличением размера ядра под действием МЦКР руды происходило снижение оптической плотности и площади цитоплазмы. При этом выявилась положительная корреляция между этими показателями. Учитывая, что величина показателя преломления непосредственно зависит от концентрации химических компонентов внутриклеточного вещества и состояния клеточных органоидов, можно предположить, что при интоксикации рудой снижается функциональное состояние цитоплазматических структур и обменных процессов [20].

Выводы

Исходя из представлений о том, что морфометрические параметры объективно отражают функциональное состояние лимфоцитов, можно говорить о перестройке клеточных звеньев иммунной системы под влиянием МЦКР. Выявленное увеличение размеров ядра и уменьшение его оптических свой­ств указывает на модификацию хроматина, а именно переход гетерохроматина в более рыхлую форму эухроматина, при этом оптическая плотность цитоплазмы и ее площадь в этот период уменьшается, что связано с ослаблением метаболической активности цитоплазмы. Следовательно, структурно-функциональные преобразования в популяции лимфоцитов, направленных на адаптацию организма к действию МЦКР, затрагивают ядерный аппарат, но не реализуются на уровне цитоплазматических процессов.

About the authors

Albina R. Nikitina

Bashkir State Medical University

Author for correspondence.
Email: nikitina.albinar@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-8186-8204
SPIN-code: 5421-8308
Ufa, Russian Federation

Klara R. Ziyakaeva

Bashkir State Medical University

Email: nikitina.albinar@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-3923-2736
SPIN-code: 3834-5307
Ufa, Russian Federation

Aliya F. Kayumova

Bashkir State Medical University

Email: nikitina.albinar@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-1983-1392
SPIN-code: 3949-6591
Ufa, Russian Federation

Valentina G. Shamratova

Bashkir State Medical University

Email: nikitina.albinar@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-7633-4264
SPIN-code: 7073-4431
Ufa, Russian Federation

References

Supplementary files