ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КОНТРОЛЯ СОСУДОВ НАД АГРЕГАЦИЕЙ ТРОМБОЦИТОВ И НЕЙТРОФИЛОВ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ

Полный текст

Потребность в увеличении производства говядины обуславливает актуальность дальнейших исследований в области физиологии крупного рогатого скота в те- чение всего онтогенеза [7; 9]. Особое внимание в связи с этим привлекает к себе кровь, состоящая из форменных элементов и плазмы [12], непрерывно переме- щающаяся по сосудам животного, обеспечивающая газообмен, доставку тканям питательных и биологически активных веществ, а также удаление из них токси- ческих веществ и шлаков [13; 14]. Успешность гемоциркуляции в капиллярах, существенно определяющая общий физиолого-биологический статус животного [12], во многом связана с особенностями агрегации тромбоцитов и нейтрофилов [6] и выраженностью контроля над ними со стороны сосудистой стенки в течение всего онтогенеза [3; 16]. Замечено, что избыточная агрегация тромбоцитов и лей- коцитов может нарушать метаболические процессы и тормозить развитие живот- ных [7]. Это приобретает особое значение при мониторинге состояния высоко- продуктивных животных [8]. В этой связи становится актуальным определение состояния сосудистого контроля над агрегацией форменных элементов крови у телят в самом начале онтогенеза - в фазу новорожденности [15]. В проведении этих исследований нуждается не только фундаментальная наука, но и практика, которой для дальнейшего развития требуется выяснение выраженности антиагре- гационных нарушений сосудов у новорожденных телят при отдельных заболева-44Глаголева Т.И., Кутафина Н.В. Физиологические аспекты контроля сосудов над агрегацией...ниях [4], оценка степени их динамики при применении различных подходов к коррекции состояния животных [5]. Все это возможно только при установлении нормативных показателей антиагрегационных свойств сосудов в отношении ос- новных форменных элементов крови.В работе поставлена цель: установить выраженность антиагрегационных воз- можностей влияния сосудов на тромбоциты и нейтрофилы у телят в течение фазы новорожденности.Материалы и методы исследованияИсследование выполнено на 32 телятах черно-пестрой и симментальской породы, взятых в исследование на 1-2-е сутки жизни. Обследование проводилось в течение фазы новорожденности пятикратно - на 1-2-е, 3-4-е, 5-6-е, 7-8-е и 9-10-е сутки жизни.Выраженность процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в плазме оценивалась по содержанию тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных про- дуктов набором «Агат-Мед» и ацилгидроперекисей (АГП) [2]. Антиокислительный потенциал жидкой части крови определялся по ее антиокислительной активности (АОА) [1].Сосудистый контроль над агрегацией тромбоцитов определяли по ее ослабле- нию в пробе с временной венозной окклюзией. Состояние агрегации тромбоци- тов (АТ) оценивали с помощью визуального микрометода оценки АТ [11] до и после венозной окклюзии с применением АДФ (0,5 × 10-4 М), коллагена (раз- ведение 1 : 2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл), ристомицина (0,8 мг/ мл), адреналина (5,0 × 10-6 М) и перекиси водорода (7,3 × 10-3 М) и бо- гатой тромбоцитами плазмы со стандартизированным количеством тромбоцитов 200 × 109 тр. Индекс антиагрегационной активности сосудистой стенки (ИААСС) выявляли при делении времени развития АТ после венозной окклюзии на время без нее.Тормозящее влияние сосудов на процесс агрегации нейтрофилов в плазме, полученной после наложения манжетки и без нее, оценивалось по торможению способности этих клеток к агрегации на фотоэлектроколориметре. В качестве индукторов применены лектин зародыша пшеницы в дозе 32 мкг/мл, конкана- валин А - 32 мкг/мл и фитогемагглютинин - 32 мкг/мл. У всех телят рассчиты- вался индекс торможения сосудистой стенкой агрегации нейтрофилов (ИТССАН) путем деления величины агрегации нейтрофилов в плазме, полученной без ман- жетки на ее величину в плазме, взятой с наложением манжетки.При статистической обработке полученных результатов применялся t-критерий Стьюдента.Результаты исследованийУ телят отмечена невысокая активность ПОЛ плазмы, имеющая тенденцию к снижению в течение срока наблюдения, - содержание в ней АГП уменьшилось с 1,53 ± 0,26 Д233/1 мл до 1,42 ± 0,31 Д233/1 мл, ТБК-активных продуктов с 3,62 ± 0,12 мкмоль/л до 3,48 ± 0,24 мкмоль/л. Это сопровождалось тенденцией к росту АОА плазмы с 32,0 ± 0,42% на 1-2-е сутки до 33,4 ± 0,28% на 9-10-е сутки.45Вестник РУДН, серия Экология и безопасность жизнедеятельности, 2016, № 4У всех телят в течение новорожденности отмечена тенденция к усилению агре- гации тромбоцитов. В пробе с временной венозной окклюзией их агрегация отмечена тенденция к замедлению АТ. Это указывало на постепенное усиле- ние контроля стенки сосуда над тромбоцитарной агрегацией у наблюдаемых телят, что подтверждалось найденной склонностью к увеличению ИААСС, достигших у телят к 9-10-м суткам жизни: для адреналина 1,64 ± 0,008, для АДФ 1,65 ± 0,004, для коллагена 1,62 ± 0,008, для тромбина 1,53 ± 0,006, для ристомицина 1,52 ± 0,004. При сочетанном применение индукторов индексы антиагрегацион- ной активности сосудистой стенки также имели склонность к увеличению (табл.).Антиагрегационный контроль сосудистой стенки над тромбоцитами и нейтрофилами у новорожденных телятТаблицаПоказательФаза новорожденности, n = 32, M ± m1-2 сут.3-4 сут.5-6 сут.7-8 сут.9-10 сут.ИААСС с АДФ1,59 ± 0,0061,60 ± 0,0051,62 ± 0,0071,64 ± 0,0051,65 ± 0,004ИААСС с коллагеном1,56 ± 0,0041,58 ± 0,0051,59 ± 0,0071,60 ± 0,0051,62 ± 0,008ИААСС с тромбином1,50 ± 0,0061,50 ± 0,0041,51 ± 0,0081,52 ± 0,0041,53 ± 0,006ИААСС с ристомицином1,49 ± 0,0051,50 ± 0,0061,50 ± 0,0091,51 ± 0,0071,52 ± 0,004ИААСС с адреналином1,62 ± 0,0031,62 ± 0,0061,63 ± 0,0051,64 ± 0,0041,64 ± 0,008ИААСС с АДФ и адреналином1,37 ± 0,0081,38 ± 0,0051,38 ± 0,0071,40 ± 0,0021,40 ± 0,004ИААСС с АДФ и коллагеном1,29 ± 0,0071,30 ± 0,0041,30 ± 0,0031,31 ± 0,0041,32 ± 0,006ИААСС с адреналином и коллагеном1,47 ± 0,0061,48 ± 0,0051,48 ± 0,0071,49 ± 0,0041,50 ± 0,003ИТССАН с лектином1,20 ± 0,0061,22 ± 0,0051,23 ± 0,0061,24 ± 0,0081,26 ± 0,008ИТССАН с конканавалином А1,22 ± 0,0051,24 ± 0,0071,24 ± 0,0081,25 ± 0,0071,26 ± 0,004ИТССАН с фитогемагглютиноном1,16 ± 0,0051,17 ± 0,0061,18 ± 0,0071,19 ± 0,0041,20 ± 0,005Примечание: достоверность динамики учитываемых показателей не получена.В течение новорожденности у телят выявлена тенденция к усилению агрегации нейтрофилов. В пробе с временной венозной окклюзией их агрегация также име- ла наклонность к ее усилению в отношении всех испытанных индукторов, что обусловило тенденцию к росту ИТССАН для лектина на 5,0%, для конканавали- на А на 3,3%, для фитогемагглютинина на 3,4% (см. табл.).Таким образом, в группе из новорожденных телят черно-пестрой и симмен- тальской пород отмечается тенденция к росту способности к агрегации тромбо- цитов и нейтрофилов и тенденция к увеличению сдерживающего контроля над нею со стороны сосудистой стенки.ОбсуждениеБольшое значение в обеспечении реологических свойств крови у телят в те- чение новорожденности имеет агрегация форменных элементов крови, находя- щихся в периферических слоях кровотока - тромбоцитов и нейтрофилов. Ста- бильно высокая АОА плазмы обеспечивает невыраженную в ней активность ПОЛ [6]. Выявленная у новорожденных телят низкая интенсивность свободноради- кальных процессов в плазме способствует незначительности перестроек в мем- бранах тромбоцитов и лейкоцитов, которые в данных условиях сохраняют невы-46Глаголева Т.И., Кутафина Н.В. Физиологические аспекты контроля сосудов над агрегацией...сокую агрегабельность, что сочетается с выраженной функциональной активно- стью эндотелиоцитов.Выраженное торможение АТ и тенденция к повышению чувствительности тромбоцитов, в том числе к дезагрегирующим воздействиям со стороны сосуди- стой стенки у телят в течение первых 10 суток жизни, имеет во многом в своей основе оптимальность выработки в эндотелии простациклина и NО [16] во мно- гом вследствие невыраженности воздействия ПОЛ из плазмы [15]. Невысокая АТ в ответ на ристомицин у телят была обусловлена неактивной выработкой в эндо- телии сосудов фактора Виллебранда. Стабильная длительность АТ с сочетаниями индукторов и количества агрегатов тромбоцитов в крови телят до и после веноз- ной окклюзии указывала на постоянство нормальных сосудисто-тромбоцитарных взаимодействий у животных в течение первых 10 суток жизни в условиях близких к реальным [5].Нормальная агрегация нейтрофилов, полученная у наблюдаемых телят, види- мо, связана с высокими антиагрегационными возможностями сосудов, сочета- ющимися с оптимумом состава гликопротеиновых рецепторов лейкоцитов и их чувствительности к лектинам, использованным в качестве индукторов. Слабая тенденция к росту лектин- и конканавалин А-индуцированной агрегации ней- трофилов у новорожденных телят обеспечивалась тенденцией к усилению экс- прессии рецепторов адгезии и увеличением в их составе участков, содержащих N-ацетил-D-глюкозамин, N-ацетил-нейраминовую кислоту и маннозу. Тенден- ция к росту индуцированной фитогемагглютинином агрегации обеспечивалось склонностью к нарастанию в их рецепторах участков гликопротеинов, содержа- щих bD-галактозу при эффективном сдерживании высокой выработкой в сосудах животных простациклина и NO.ЗаключениеВ группе новорожденных телят черно-пестрой и симментальской пород вы- является тенденция к усилению агрегации форменных элементов крови. Для этих животных в течение новорожденности характерно некоторое усиление дезагре- гирующего контроля со стороны сосудистой стенки над агрегационными свой- ствами тромбоцитов и нейтрофилов.

Об авторах

Т И Глаголева

Всероссийский НИИ физиологии, биохимии и питания животных, г. Боровск

п. Институт, г. Боровск, Калужская область, Россия, 249013

Н В Кутафина

Всероссийский НИИ физиологии, биохимии и питания животных, г. Боровск

п. Институт, г. Боровск, Калужская область, Россия, 249013

Список литературы